溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性，一般疏水性越大，分配系数越大。当固定相一定时，可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。rpc主要应用于相对分子低于5000，---是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化，也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。由于反相介质表面为---疏水性，并且流动相为低极性的，生物活性大分子在rpc分离过程中容易变性失活，所以，以回收生物活性蛋白质为目的时，应注意选用适宜的反相介质。
和其它分析仪器一样，你若想让hplc---地为你工作、得到---的数据，首先你要保养好它，使它处于一个---的待机状态，这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获得理想的结果。而且---规范的操作习惯可以延长仪器使用寿命。大家在学校或接受仪器公司培训的时候，waters i-class液相怎么用，老师或---会提出很多的操作注意事项。流动相脱气可以避免hplc系统出问题，从而顺利得到理想的数据。
由以上方法可知，在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。
色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。
使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。
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