溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性，一般疏水性越大，分配系数越大。当固定相一定时，可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。rpc主要应用于相对分子低于5000，---是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化，也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。由于反相介质表面为---疏水性，并且流动相为低极性的，waters h-class液相哪里有，生物活性大分子在rpc分离过程中容易变性失活，所以，以回收生物活性蛋白质为目的时，应注意选用适宜的反相介质。
目前，应用较多的是键合固定相。在这种固体相中，固定液不是涂在载体表面，而是通过化学反应在纯硅胶颗粒表面键合上某种有机基团。图1 分配色谱的分配类型例如，利用---十八与硅胶表面的---(-oh)之间的反应就可以形成一化表面。这种固定液的优点是不易被流动相剥蚀。在分配色谱法中，流动相可为纯溶剂，也可以采用混合溶剂进行梯度淋洗，其极性应与固定液差别大一些，以避免两者之间相溶。通常可分为正相分配和反相分配，如图1所示。
分配色谱法这种色谱的流动相和固定相都是液体，样品分子在两个液相之间很快达到平衡分配，利用各组分在两相中分配系数的差异进行分离，类似于萃取过程。一般常用的固定液有β，β-氧二(odpn)、---(peg400～4000)、撑乙二醇(tmg)和角鲨烷(sq)。采用与气相色谱(gc)同样的方法，将固定液涂渍在多孔的载体表面，但在使用中固定液易流失。
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