




液相色谱能完成难度较高的分离工作a.气相色谱的流动相载气是色谱惰性的,基本不参与分配平衡过程,与样品分子无亲和作用,样品分子主要与固定相相互作用。而在液相色谱中流动相液体也与固定相争夺样品分子,为提高选择性增加了一个因素。也可选择不同比例的两种或两种以上的液体做流动相,增加分离的选择性。b.液相色谱固定相类型多,如离子交换色谱和排阻色谱等,作为分析时,选择余地大;而气相色谱并不可能。

溶质在反相介质上的分配系数取决于溶质的疏水性,一般疏水性越大,waters h-class液相哪里好,分配系数越大。当固定相一定时,可以通过调节流动相的组成调整溶质的分配系数。rpc主要应用于相对分子低于5000,---是1000以下的非极性小分子物质的分析和纯化,也可以用于蛋白质等生物大分子的分析和纯化。由于反相介质表面为---疏水性,并且流动相为低极性的,生物活性大分子在rpc分离过程中容易变性失活,所以,以回收生物活性蛋白质为目的时,应注意选用适宜的反相介质。

目前,应用较多的是键合固定相。在这种固体相中,固定液不是涂在载体表面,而是通过化学反应在纯硅胶颗粒表面键合上某种有机基团。图1 分配色谱的分配类型例如,利用---十八与硅胶表面的---(-oh)之间的反应就可以形成一化表面。这种固定液的优点是不易被流动相剥蚀。在分配色谱法中,流动相可为纯溶剂,也可以采用混合溶剂进行梯度淋洗,其极性应与固定液差别大一些,以避免两者之间相溶。通常可分为正相分配和反相分配,如图1所示。

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